此，史迪威与蒋介石的矛盾越来越表面化。史迪威多次向美国总统罗斯福写报告，说蒋介石是无能大小人，蒋介石的政府是腐败无能的政府。当时，罗斯福急于要中国军队在中国开辟第二战场联手打击日本军队，对史迪威的报告没有给予过多的理睬。
也正因为如此，由于是罗斯福的邀请蒋介石参加了开罗会议。
蒋介石出席开罗会议，这是他在第二次世界大战中惟一一次参加的国际首脑会议。罗斯福主要是想通过此次会议，希望蒋介石往后能主动积极地对日本军队作战。所以，当蒋介石在会上提出要求战后返还被日本武力夺去的台湾、澎湖列岛时，罗斯福和丘吉尔均表示了同意。但在谈到对日本军队作战的问题时，蒋介石已看出罗斯福急于想在中国开辟第二战场的心情，就言语支吾，推说中国军队装备落后，加上补给困难，要发起对日本军队的大规模作战有些力不从心。对蒋介石的态度，罗斯福虽然口头上表示了理解，但内心里是十分不满的。据罗斯福儿子的回忆录记载，罗斯福在开罗会见了蒋介石后说：“我现在明白了，蒋介石的军队一心只放在监视共产党的军队上，根本无心和日本军队作战。我相信蒋介石的确在妨碍史迪威的训练计划。”对罗斯福的内心想法，蒋介石是蒙在鼓里的。开罗会议上，蒋介石以为罗斯福同情中国，向美国提出了不少的条件，其中最大的要求是要美国提供十亿美元的援助。当时，罗斯福不好薄蒋介石的面子没有直接拒绝，只是说他个人是同意的，但要经过国会批准。但蒋介石以为罗斯福个人同意就等同于美国政府同意了，曾多次向罗斯福催要这十亿美元。在开罗会议上，曾决定中国军队和英国海军与一九四三年底发起第二次缅甸战役。后来美英变更了作战计划，英国不配合中国进攻，罗斯福要求中国先单独发起第二次缅甸战役。蒋介石为此给罗斯福回电说：“如果阁下给我十亿美元，再把空运量加倍的话，我就同意。否则中国就要把第二次缅甸战役推后到一九四四年的雨季以后。”蒋介石的态度激怒了美国人，在美国人的眼里，只张口要钱，不出兵打战，这和以往的中国军阀有什么两样？史迪威就此质问蒋介石：“如果这些条件不能满足的话，中国就要停止抗战吗？”蒋介石说：“中国已经单独抗战六年了。”史迪威反问：“这也能作为条件吗？”蒋介石沉默不语了。此外，在开罗会议上还决定在中国的成都修建机场，作为美军飞机轰炸日本的基地。蒋介石回国后动员了四十五万民工在没有任何机械的情况下，只用了六十天就修建成了机场。过后，蒋介石给罗斯福送去了帐单，要求美国支付机场建设费用八亿美元。罗斯福得知后大怒，他认为修个机场也要这么多的钱，完全是无赖行为。罗斯福在给蒋介石的回电中强硬地说：“请阁下协助史迪威的作战计划，向缅甸的日军发起攻击，否则美国将断绝一切援助。”
蒋介石在罗斯福的强压下被迫出兵，让何应钦率新军进入缅甸，开始了第二次缅甸战役。
但蒋介石对美国人不给钱耿耿于怀，既然修建机场的钱美国人不付，那么罗斯福答应的十亿美元的贷款总得给吧。蒋介石为这笔十亿美元，紧盯着罗斯福不放。但这十亿美元的贷款，在美国国内引起了很大争议。原来在这之前，美国国会已批准无条件给中国政府五亿美元的贷款，而且有一半付给了中国政府。可是，过后根据美国财政部的调查，在中国政府提取的美元中有八千万元已经存入了孔祥熙等人的私人帐号。中国政府后来虽然对此作了一些解释，但美国政府对中国官员这种“公私不分”使用国家资金的方式非常恼火。也正因为有这样的不良记录，结果蒋介石要求的十亿美元贷款一分也没有拿到。其实，美国最初并没有考虑向中国贷款，而是准备无偿向中国提供武器装备，让中国军队承担对日本军队作战的主要任务。但蒋介石要美国提供美金形式的经济援助，似乎对美元的热情远远大于对武器装备的热情。美国人开始明白蒋介石的用心了，蒋试图用美元来维持国民党的独裁统治，并把巩固自己的统治地位放在了最重要的位置上。当时，按照中国和美国签订的《租借协定》，美国向中国提供价值三十五亿美元的军用物资。当这些援助物资运进中国后，有很大一部分下落不明，腐败的国民党政府官员都想从中捞好处。不久这些战略物资出现在了黑市，而且不少军用物资还通过走私的方式卖给了日本人。史迪威在向美国总统罗斯福的密报材料里，把国民党政府对军用物资的走私贪污称为是“二战中最大的丑闻”。
一九四四年春季开始后，由于日本军队在太平洋战场上连连败退，海上的运输线被美国军队切断。为此，日本设想在中国大陆打通一条从满洲到越南的陆上通道，并攻占美国在中国大陆的军用机场。不久，日本结集五十多万军队向豫湘桂地区大举进攻。驻守河南汤恩伯的军队有四十多万人，面对五万多日军的进攻竟然全线溃败。同时，面对日本军队的进攻其他地区的中国军队也无心抵抗，在战场上甚至出现了几百人的日军可轻松俘获上万人的中国军队的状况。在历时八个月的作战中，中国军队损失兵力约五、六十万人，丧失河南、湖南、广东和广西等省的大部份土地，丢失大小城市一百四十六座以及美军空军基地七个，还有其它飞机场三十六个。罗斯福总统对中国军队的表现非常不满，为什么中国军队一败再败？罗斯福派副总统华莱士到中国视察，看看问题到底出在哪里。
蒋介石为了给华莱士一个好的印象，他要戴笠把重庆的乞丐全部关进了收容所。
但华莱士对蒋介石政府的印象仍然很糟糕，事后他对蒋的政府的评价是“一个由地主、军阀和银行家支持的落后无知的政府”。不久，华莱士在中国向罗斯福总统发了如下的电报：“我们对蒋介石的支持恐怕是一项短期投资，他实在没有治理战后中国的智慧和政治力量，战后中国领袖大概将会通过政治变革或革命的方式产生出来。从现在的状况来看，战后中国的领袖出自后者的可能性更大。”罗斯福这才感觉到，史迪威多次要求改革中国军队的建议是必要的，而且他开始考虑让史迪威来接替蒋介石担任中国战区的最高指挥官。一九四四年七月，罗斯福给蒋介石发电说：“鉴于中国战局危急，我感到有必要让史迪威指挥在中国的全部中国军队和美国军队，包括共产党军队在内……我理解阁下对史迪威将军的感情，但我找不出另外的人选，具有史迪威那样的能力和决心，是能够实现我们打败日本的计划的。为此，我把史迪威晋升为四星上将，请阁下把中国战区的军队指挥权移交给史迪威将军。”
由于，此时中国军队在日本军队的攻势下连连惨败，蒋介石尽管对罗斯福的电文充满愤怒，但也不好公开拒绝。但蒋介石毕竟是政坛老手，他巧妙地使用了拖延战术。蒋介石在给罗斯福回电时说，他原则上同意把中国军队的指挥权移交给史迪威，但他要罗斯福给一些时间，他要仔细考虑让史迪威担任全权指挥的具体办法。与此同时，蒋介石派宋子文到美国活动，拉拢美国政界的要人为他在罗斯福面前说情。但罗斯福并没有让步，接连四封电报发给蒋介石催促他尽快把中国军队的指挥权交给史迪威。此时，蒋介石不得不作出些表面上的让步，请罗斯福派一个特使来中国协调移交军权的工作。于是，罗斯福派赫尔利到中国与蒋介石具体协商。经俩人几次会谈，达成以下协议：一、史迪威的职务名称为“中华民国陆、空军前敌总司令”；二、史迪威亲自指挥中国陆、空军的对日作战，但作战计划必须经军事委员会审议；三、史迪威对其管辖的军队，可依据中华民国法律实施奖惩任免。虽然名义上史迪威已是中国军队的最高指挥官，但蒋介石仍然没有把实权交给史迪威，罗斯福对此十分恼火。没过多少时间，罗斯福又接到史迪威的来电说，蒋介石准备抽调在缅甸的中国远征军回国，意在坐等美国打败日本的胜利成果。
对此，罗斯福的愤怒是可想而知的，他用向部下发布命令的方式向蒋介石发电说：“请立即把指挥权交给史迪威，一刻也不要再犹豫。”这封电报是由史迪威转交给蒋介石的，当时蒋介石在重庆郊外召开高级军事会议。史迪威本想让翻译当众宣读罗斯福的电报内容，但正在参加会谈的赫尔利阻止了史迪威，把电报译文交给了蒋介石。蒋介石看了电报内容后，神情凝重，他沉默了片刻后宣布了散会。等其他人都离开会场后，会议室里只留下蒋介石和宋子文，这时宋子文见已近六十岁的蒋介石竟像孩子似的抱头嚎啕痛哭。罗斯福的电报竟不顾蒋介石为国家元首的身份，用下命令的口吻让蒋介石交出军权，极大地伤害了蒋介石的自尊，他在这天的日记里写道：“实为余平生最大之耻辱。”
面对罗斯福的“最后通牒”，蒋介石仍旧没有把军权交给史迪威，而是以史迪威得不到中国人的信任所以不能把军队的指挥权交给他，并要罗斯福另派一个中国人可信任的人来，他就同意交出指挥权。于是，蒋介石与宋子文一道致电罗斯福，答应由美国人任中国军队总司令，但永远不同意由史迪威担任。蒋介石还在给罗斯福的电文里表明了自己的底线：“中国国家与个人之人格，如稍有损丧，则余必不惜任何牺牲，决不能因循迁就，否则即使联盟国作战完全胜利，则虽胜犹败。”此时，蒋介石把国家与他个人的人格放在了最重要的位置上。蒋介石不惜决裂的态度，使罗斯福感到了为难。美国虽然不喜欢蒋介石，但也没有其他的解决办法。美国副总统华莱士说：“除支持蒋介石外，好像没有其他的办法，现今